坚持高质量既快又省的做好常规切片
坚持高质量既快又省的做好常规切片江西医学院病理解剖学教研室姜鸷滋杨光娅从国内外情况来看,常规切片和HE染色在病理学日常工作中仍占有很重要地位。在坚持高质量的前提下如何节约药品降低成本,如何缩短工时及早发出报告还能作些改进,现对几个重要环节提出一些可行性做法,以供基层病理工作者参考。一、介绍我室外检工作过程目前外检尚无换代的加-r-r.艺可采用,只能“坚持原有工序基本不变,着眼于快、省的进行调整”。我室虽无脱水机等先进设Lgs9~(第24卷)第2期备,但常规切片能在收到组织后36—48小时内发出报告,这在国内外也属先进。其具体做法是:上午11时半取材;下午脱水,晚上进蜡,翌日上午做片,下午镜检发出报告。二,酒精的节约使用酒精是用量最大的常规试剂,如何节约使用值得重视。我们提出如下6条措施:(1)常规制片用的无水酒精应采用化学纯的,而不用分析纯酒精。(、2)配低浓度酒精时不用无水酒精。(3)一般分化多用盐酸115酒精,我们改用稀盐酸水,每次可节约95%酒精319mi,(4)部汾高浓度酒精注意综合利扁、(5)改变更换酒精方法,不主张全部换,如组织脱水用酒精仅换AF和无水酒精(Ⅱ),其池各级向前移。切片脱蜡进水用的酒精注住含一定的石蜡和二甲苯,故要全换,否则进水不良。切片脱水用酒精只换无水酒精,其他前移,部份95%酒精可加入伊红染液中以补充挥发的酒精。(6)每步操作均应拭干染色架,滴干溶液,从而延长溶液使用寿命。有人将废酒精重新蒸馏进行回收,但能耗大,也有人在无水酒精中加硫酸铜吸水,但作用不大,故均不主张采用。三,二甲苯的综合利用·二甲苯用量较大,但不主张采用对机体危害更大的代用品(汽油,甲芣、苯),也.不主张重新蒸馏回收,而重点在综合利用。二甲苯主要用于脱蜡和透明。组织透明用的二甲苯内常有脂质和酒精存集,而失去透明能力,故要定期更换,其换下的二甲苯可用于浸洗进蜡铜框。切片透明用的二甲苯常会有酒精和水,也要定期更换。四、切片石蜡的代用和节约我们在外检常规切片中通常使用工业用蜡进行包埋,很少使用切片石蜡。工业若荫价廉,但工业用蜡也有缺点,如熔点偏高;·:;颗粒粗大,分子结构松散,如不纠正上述缺点则会影响切片的质量。在使用中注意炼制和掺旧蜡就可改变其物理持性,达到专用石蜡的效能。使用工业用蜡要严格注意温箱内的温度,在包埋时更不要将蜡杯在电炉上强行加热,因组织在高温下将变脆收缩,而使很多抗原性成分失去活注?从而造成免疫酶反应假阴性。另外应降低每个蜡块的用蜡量:(1)主张多块组织拼埋,既可减少蜡块总数节约用蜡,还可减少盖、载玻片的消耗量,更利于压缩贮存档案的空间。(2)116蜡块宜做薄,四周空白区不要太宽。(3)蜡块四角应切去,有利于蜡带分离。切下的蜡屑,废蜡和无用蜡块要重溶再用,以1:工掺入,新蜡中,既利废,!还能改善新蜡的分子结构,使新蜡更符合切片要求。废蜡中往往有组织碎屑和其他不洁物,用前一定要过滤。其做法是取一只大漏斗,:下接相应容器,漏斗内放几层卫生纸,将等分新旧蜡放入漏斗中,并放入温箱中自行过滤,但放入的蜡量蘩适中,严格注意防止外溢。·.·,_!-五、推荐一种新的HE染料药盒HE染色的质量近年来通过评比和质控,质量有了一定的提高,但很不稳定,原因很多,其中有业务水平问题,也有试剂质量问题,后者更为重要。;因此,我们设想搞一套苏木素一伊红染料药盒,使试剂配制规范化、简单化,经过数年来的努力,经大面积试用,并经过8—9次配方的调整,现已基本定型。苏木素染料共两瓶(;溶剂,活化剂各1瓶。配制方法是秤取苏木素2g放入空盐水瓶中,倒入溶剂将苏木素溶解,再倒入活化剂摇动3分钟,加入蒸馏水500ml,摇动后即可使用,不要另加任何药品,也不要加热煮沸。其质量接近Gill或Carazzi氏苏木素,但价格低廉,可用于常规HE染色,也可和天蓝石蓝配合作抗酸性核染色,还可用于脂肪、酶标等染色对比性核染色。另外,此药盒还可配制出快速苏木素染液(0.8—1分钟即可染好细胞核,适用于快蜡和冰冻)和高稳定性苏木素溶液(在有效期限内不形成金属膜,无沉淀)。用此配方染色,其核着色蓝黑,结构清晰,有的切片存放3年未退色。药盒中伊红染料为醇溶性去钠纯化伊红,故着色鲜艳,不退色,性稳定,着色快。为了配合使用药盒,我们对原有染色步骤也作了相应调整。‘六,其他莲』l』l茧有单位在染色后,切片不经过酒精脱水,而放入温箱内烤干直接封片,虽能节约但也存在一些问题。(1)切片稍厚易脱落;(2)切片中经常出现“黑核”,(3)高倍镜下有些结构不清,透明度稍差,(4)组织收缩明显。我们认为这种方法还是不用好,如采用宜在烤干后再放在二甲苯中透明2—3分钟再封片。;.
文章来源:《诊断病理学杂志》 网址: http://www.zdblxzz.cn/qikandaodu/2021/0622/625.html
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